缓冲溶液名词解释 缓冲溶液的原理
1. 培育抗虫棉的流程,需经过筛选与获取目的基因、构建基因表达载体、将目的基因导入受体细胞以及检测与鉴定目的基因等四个主要步骤。
2. 在基因工程中,目的基因是指能够改变受体细胞性状或获得预期表达产物的基因。
3. 苏云金杆菌通过产生Bt抗虫蛋白,这是一种有效的害虫控制手段,专门针对棉铃虫进行生物杀灭。
4. PCR技术,即聚合酶链式反应,是快速扩增DNA的关键技术。它依赖于DNA半保留复制的原理,需在特定的温度控制下,以脱氧核苷酸为原料,在DNA聚合酶的催化下进行体外复制。
5. 为了保证PCR反应的顺利进行,需要提供镁离子激活的真核细胞和细菌的DNA聚合酶,并在缓冲溶液中进行。
6. 引物是PCR反应中的关键组成部分,它是一段能与DNA模板链互补配对的短单链核酸。
7. PCR扩增过程包括:DNA受热解链、引物与模板链结合、以及在DNA聚合酶作用下进行延伸反应,反复此过程以实现目的基因的扩增。
8. PCR循环过程中,需经过变性(高温)、复性(中温)和延伸(较低温度)三个阶段。
9. PCR产物的鉴定通常采用琼脂糖凝胶电泳方法,以确认扩增的目的基因片段是否正确。
10. 构建基因表达载体时,需包括目的基因、标记基因、启动子和终止子等关键元件。
11. 启动子是位于基因上游的特殊序列DN段,它是RNA聚合酶的识别和结合位点,负责驱动基因转录。
12. 终止子则是一段特殊的DNA序列,它位于基因下游,如同一个信号灯,标志基因转录的结束。
13. 通过限制酶的切割和DNA连接酶的连接作用,我们可以将目的基因片段与载体拼接在一起,形成重组DNA分子。
14. 将目的基因导入受体细胞的过程中,可以采用花粉管通道法、微量注射器法等不同的方法。
15. 除了花粉管通道法外,农杆菌转化法也是常用的将目的基因导入植物的方法。
16. 转化过程是指目的基因进入受体细胞并在其中稳定维持和表达的过程。
17. 农杆菌可以利用其Ti质粒上的T-DNA将目的基因整合到植物细胞的染色体DNA上。
18. 目的基因的检测与鉴定包括分子水平检测和个体生物学水平鉴定两个层面,通过PCR等技术确认目的基因是否成功插入和表达。
19. 整个基因工程操作可以概括为获取载体和目的基因、切割和连接、导入受体细胞、以及检测与鉴定等步骤。
20. 在动物卵中导入目的基因常用显微注射法。在基因工程中,原核生物常被用作受体细胞,其中大肠杆菌应用最为广泛。
21. 通过抗虫棉的应用,成功控制了棉铃虫的种群数量,显著减少了农使用量,对环境保护和农业可持续发展具有重要意义。